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產(chǎn)品名稱:PEI Prime™ ? AQ 1 mg/mL Liquid Transfection Reagent
產(chǎn)品貨號:Prime-AQ100-100ML
產(chǎn)品說明:
PEI Prime™ ? 是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,旨在實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定,低成本和可擴(kuò)展的瞬時基因表達(dá)。PEI是用于HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)物瞬時轉(zhuǎn)染的z受歡迎的試劑。PEI Prime™ ? 是在哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)重組蛋白,抗體和病毒的選擇試劑。
PEI Prime™ ? AQ 是一種含有純PEI Prime™ ? 的1 mg / mL pH值調(diào)節(jié)和無菌過濾溶液。
產(chǎn)品名稱: Serochem AQ 液體轉(zhuǎn)染試劑 PEI Prime ? 產(chǎn)品貨號:Prime-AQ100-100ML
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Serochem廣州代理商:重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司
轉(zhuǎn)染前
傳代培養(yǎng)并擴(kuò)增細(xì)胞,以獲得存活率大于95%且活細(xì)胞密度介于(1.5到2.0)x10之間的培養(yǎng)物
轉(zhuǎn)染時為6個細(xì)胞/mL。轉(zhuǎn)染1。在轉(zhuǎn)染前,確保存活率大于95%,活細(xì)胞密度為(1.5至2.0)x10
6個細(xì)胞/mL。2。將活細(xì)胞密度稀釋至1.05 x 10
每毫升6個細(xì)胞。反轉(zhuǎn)pDNA和PEI素數(shù)™ 1mg/mL試劑容器多次攪拌均勻。4將1μg pDNA轉(zhuǎn)移到干凈的小瓶中,每毫升培養(yǎng)液中轉(zhuǎn)移1μg pDNA。用新鮮培養(yǎng)基稀釋至40μg/mL。5將3μL PEI Prime轉(zhuǎn)移到干凈的小瓶中™ 每毫升要轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)物為1mg/mL。
使用培養(yǎng)基稀釋至120μg/mL。6。混合稀釋的pDNA和PEI Prime™. 倒轉(zhuǎn)幾次,讓蓋子在室溫下休息10分鐘。在使用前,輕輕地將封閉的容器倒置一次。7每95毫升要轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)物使用5毫升pDNA/PEI混合物。混合時逐漸加入培養(yǎng)基中。8在典型條件下培養(yǎng)細(xì)胞。
轉(zhuǎn)染后
如果使用飼料,助推器,補(bǔ)充劑,或增強(qiáng)劑,這些都可以安全地添加到任何時間后6小時轉(zhuǎn)染。如果需要,也可以在6小時后準(zhǔn)備亞培養(yǎng)。如果使用GFP對照,48小時后應(yīng)觀察到80%以上的轉(zhuǎn)染效率。對于優(yōu)化的程序,效率超過90%是合理的。監(jiān)測表達(dá)水平和收獲觀察穩(wěn)定滴度。對于典型的批處理過程,分泌的蛋白質(zhì)通常在轉(zhuǎn)染后5到7天達(dá)到大值
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