電泳槽是凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分,其系統(tǒng)的迅猛發(fā)展主要也是體現(xiàn)在電泳槽上。根據(jù)電泳的原理,凝膠都是放在兩個(gè)緩沖腔之間,電場(chǎng)通過(guò)凝膠連接兩個(gè)緩沖腔。緩沖液和凝膠之間的接觸可以是直接的液體接觸,也可以間接通過(guò)凝膠條或?yàn)V紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場(chǎng),但在裝置設(shè)計(jì)上有一些困難,如液體泄漏,電安全和操作麻煩等問(wèn)題。水平板狀電泳槽大多通過(guò)間接方式,用濾紙橋搭接以及最近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接,即半干技術(shù),后種方式使裝置簡(jiǎn)化,操作也大大方便。 電泳槽的使用:
1、將凝膠密封條框放在平板上,然后將凹型玻璃板與平板玻璃重疊。
2、將兩塊玻璃立起來(lái)使其底端接觸桌面,用手將兩塊玻璃板夾住放入電泳槽內(nèi),然后插入斜楔板(直面對(duì)玻璃,斜面對(duì)槽)到適中程度,即可灌膠。
3、凝膠凝結(jié)后,輕輕取下梳子。
4、用手夾住兩塊玻璃板,上提斜楔板,使其松開(kāi),然后取下玻璃膠室去掉凝膠密封框,注意在上述過(guò)程中手始終給玻璃膠室一個(gè)壓緊力,再將玻璃膠室凹面朝里置入電泳槽,插入斜楔板,將緩沖液加至內(nèi)槽玻璃凹口以上,外槽緩沖液加到距玻璃上沿3mm處即可電泳,注意避免在膠室下端出現(xiàn)氣泡。
5、加樣時(shí)可用加樣器斜靠在提手邊緣的凹槽內(nèi),以準(zhǔn)確定位加樣位置。蓋好上蓋,在電壓150伏以下進(jìn)行電泳分離,根據(jù)指示劑位置確定電泳時(shí)間。電泳結(jié)束后,關(guān)掉電源按住本體提手打開(kāi)上蓋,拔掉固定板,取出玻璃板,用刀片或薄板輕輕將玻璃夾層分開(kāi)。本電泳槽同時(shí)可進(jìn)行雙板電泳,如果只跑一塊膠時(shí),需要在另外一側(cè)用單膠替代板代替玻璃。
注意事項(xiàng):
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2、儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過(guò)的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過(guò)儀器額定電流時(shí)(zui大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開(kāi)機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開(kāi)機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6、使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。