對于細胞培養而言,血清的重要性顯而易見。它含有包括生長因子在內的蛋白、氨基酸、脂類、碳水化合物、維生素及其他組分,可以促進貼壁或懸浮細胞的生長和維持。胎牛血清(FBS)是細胞培養常用的血清。
什么是胎牛血清?
胎牛血清是指懷孕5-8個月的母牛被屠宰后,發育未*的胎牛心臟穿刺采血獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發育因子,一旦胚胎發育*這些因子自動消失。
何為內毒素?它的作用是什么?
內毒素(Endotoxin)是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的*成分。細菌在生存狀態時釋放不出來,只有當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,才表現其毒性。內毒素的主要化學成分是脂多糖中的類脂A成分。內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此,血清應進行內毒素水平檢測。國際上規定,胎牛血清的級別應以內毒素水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內毒素應<10EU/ml。
胎牛血清的成分有下面幾大類:
1.蛋白質類
包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉鐵蛋白(能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;
2多肽類
主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,最主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;
3.激素類
激素對細胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用:促生長激素:促進細胞增殖的效應;氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的氫化可的松,在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導細胞發生分化的作用。
4.其他成分
如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養基中這些成分的作用并不明顯,與蛋白相結合的微量元素對細胞生長起促進作用。