如何避免血清中產生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產生:
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(2) 血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
5、 培養基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2)血清質量不好,反復凍融的結果;
(3)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4)配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
細胞培養中如何防止黑點生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數。
(2) 培養基無需37℃水浴。
(3) 培養基保持jiaPH值7.0- 7.2。
(4) 嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
(5) 掌握細胞傳代的jia時機,細胞切勿生長過老。